动物组织研磨仪针对动物样品的实验方法
动物组织研磨仪具有对称的一对高速大振幅的摇臂,通过研磨珠在样品管内来回不规则撞击及摩擦,在几秒到几分钟内轻松实现样品的研磨、粉碎、混合及细胞破壁。精细的研磨,细可以达到5微米。
对于不同的的样品,动物组织研磨仪需要用不同的条件来处理,这里面主要涉及研磨速度、研磨时间、研磨温度和研磨珠的选择。以下是动物组织研磨仪针对动物样品的实验方法,仅供参考。
实验一 昆虫动物组织研磨
实验材料: 蚕蛾、蚕蛹组织
1 取蚕蛾一只,剪碎,取其身体组织一块(直径不超过8mm)放置于2ml离心管(EP管)中。
2 将管中加入1颗直径为5mm碳化钨研磨珠
3 将加完样品和研磨珠的EP管,在适配器上摆好,开盖,加液氮冷冻;3~5分钟后,待样品在冷冻的情况下脱去水分,及时将EP管的盖封闭上,继续在液氮中遇冷3分钟。
4 迅速将适配器安置到动物组织研磨仪上。
5 1600rpm条件下,用动物组织研磨仪研磨2分钟,可得到细碎的样品粉末,用于提核酸或蛋白。(研磨时间和转速还可以进一步优化)同样的方法对蚕蛹可行,研磨时间可适当增加,效果也非常好!
同类实验对象:
动物组织研磨仪以昆虫作为研究材料;需要高通量提取核酸、蛋白进行遗传或是生理生化分析研究的实验
实验二 哺乳动物组织研磨
实验样品:小鼠 心脏,脾脏,肝脏组织(动物内脏组织核酸提取)
1、取-80℃冷冻过小鼠组织,直径不超过5mm放入2ml圆底离心管
2、在离心管中加含有protease inhibitor裂解液;3~5分钟后,待组织块在裂解液中解冻。
3、加入5mm不锈钢研磨珠1-2颗
4、用动物组织研磨仪1500rpm, 研磨2min
实验结果3种组织基本被打碎,肝脏组织裂解都比较*,心脏和脾脏在可能会见碎片(如用新鲜组织效果较好),可用重复研磨解决。
同类实验对象:
以哺乳动物内脏组织为处理样品;样品量小,通量高。需要从内脏组织中提取核酸物质、或进行理化成分分析的实验。
动物组织研磨仪是名副其实的实验室样品制备的多面手,它可以对硬性、软性、弹性等样品进行快速的粉碎和均相化处理,符合理化分析实验室的要求,配置不同体积、不同材料的研磨罐,可以进行干磨、湿磨及冷冻研磨,也可以进行细胞破碎和DNA/RNA提取,在生物医药、农业、食品、检测等领域应用广泛。
动物组织研磨仪的结构简单,仍需正确使用,做好日常维护保养,使用中应注意如下几点:研磨机连续工作时间过长时,抛光辊摩擦生热温度高,易烫伤革面,需降温后再操作。工作前后,应清洁抛光辊表面,并打蜡保持辊面光滑无尘。使用中,控制供料辊压力适当,以免阻力太大,电器发热易烧坏。做好传动链各转动部位的润滑,保持传动准确可靠。